口腔修複臨床工（gōng）作中,取印模及灌注模型等操作所引起的交叉感染,在國外已受到口腔醫（yī）師的日益重視。Powell 等1 對（duì）100 份取自不同城市印（yìn）模的檢驗表明,67 %樣品有病原菌存在。Gerhardt 等2 的研究證明（míng）,藻（zǎo）酸鹽印模表麵（miàn）有滯留、吸附病毒的能力。Leunge 等3 的（de）研究顯（xiǎn）示,微生物可由印模（mó）汙染石膏模（mó）、製作者,乃至打磨、拋光設備,從而引起交叉感染。據Runnell 4 的調查,美國修複科醫生血漿中HBV 陽性率（lǜ）高達1712 % ,遠高於美國大眾的215 %。鑒於（yú）此,歐美國家的（de）許多臨（lín）床醫師提（tí）出在修（xiū）複操作中應嚴格遵守無菌操作原（yuán）則,並展開了大量的研（yán）究工作。

      本（běn）研（yán）究比較2 %戊二醛和5 %艾力克浸泡或（huò）噴塗,以及臭氧櫃對口腔印模（mó）及石（shí）膏模型的消毒作用,以探求（qiú）適合我（wǒ）國（guó）國情的（de）印模和石膏模型（xíng）消毒（dú）方法。

1 　材料和方法

1. 1 　材料和設備

①Jeltrate 藻酸鉀印模粉普通凝固型 ,用臭氧消毒櫃（guì）處理2 h。

②石膏母模,橡皮碗,調拌刀,托盤等,120 ℃高壓（yā）蒸氣滅菌處（chù）理60 min。

③013 %Na2SO4 溶液,作為消毒劑的中和液。篩選實驗證實本身及與消（xiāo）毒劑的反應產物對幾種實驗菌均無抑製作用。

④2 %戊二醛溶液（yè）(華西醫科大學公共衛生學院配製) 。

⑤5 %艾力克溶液(華西醫科大學公共衛生（shēng）學院生產) 。

⑥臭氧消毒櫃 。

⑦表皮葡萄球菌菌株、血液鏈球菌（jun1）ATCC1057、枯草杆（gǎn）菌芽（yá）孢ATCC19659(均由華西醫科大學口腔生物醫學工（gōng）程重點實驗室微（wēi）生物實驗室提供) 。

⑧Die2stone人造（zào）石粉 。

1. 2 　材料製備

①製備細菌懸液 取4～14 代表皮葡萄球菌培養（yǎng）平板（bǎn）,挑取菌（jun1）苔,以無菌生理鹽水稀釋至濃度108 個/ ml 。用同樣（yàng）方法分別製備血液鏈球菌（jun1）懸液和枯（kū）草杆菌芽孢菌懸液。

②製（zhì）取無菌印模和石膏模型 藻酸鉀印模材料用無菌生理鹽水調拌,用滅菌後的托盤及母模取57 個印模待用。製取24 個（gè）上頜石膏模型,經高溫蒸氣滅菌,然後用（yòng）無菌生（shēng）理鹽水將其潤濕（shī）待（dài）用。

1. 3 　實驗分組和方法

1.3.1   分組　

      按照所（suǒ）塗細（xì）菌不（bú）同分為表皮葡萄球菌組、血液（yè）鏈球（qiú）菌組和枯草杆菌芽孢組。每組中3 個無菌印模和（hé）3個無菌石膏模型不染菌作空白對照。餘16 個印模和（hé）5 個石膏模型,用無菌棉簽分別蘸取3 種不同細菌懸液在表麵均勻塗（tú）抹（mò）兩遍。然後再次分組作以下處理: ①2 %戊二醛處理組:1 個印模染菌後立即取（qǔ）樣作陽性對照,1 個印模染菌後靜置10 min 取樣,3 個印模用2 %戊二（èr）醛浸（jìn）泡10 min ,3 個印模以2 %戊二醛噴塗後10 min 取樣。②5 %艾力克處理組:1 個印模染菌後立即取樣作陽性對照,1 個印模染菌後靜置10 min取樣,3 個印模用5 %艾力（lì）克溶液浸泡10 min ,3 個印模（mó）以5 %艾（ài）力克液噴塗（tú）後10 min 取樣。③臭氧櫃處理組:1 個石膏模型（xíng）染菌後立即取（qǔ）樣作陽性對照,1 個石膏模型染菌後靜置1h ,3 個石（shí）膏模型染菌後臭氧消（xiāo）毒櫃處理1 h 取樣。操作中,噴塗（tú）使用同一類型噴槍,噴嘴（zuǐ）距印模表麵20 cm ,以每秒1 次的（de）頻率（lǜ）噴塗10 次,控（kòng）製噴塗壓力一致（zhì）。

1. 3. 2 　方法　

①所有印模均經中和液處理。吸取5 ml 中（zhōng）和液,分次衝洗印（yìn）模表麵（miàn）,中和消毒劑防（fáng）止其繼續抑製細菌生長。石膏模型不用中和（hé）液處理。

②取樣（yàng）,接種菌落（luò）計數,每個印模及石膏模型表麵各加注5 ml 無菌生理鹽（yán）水,用振蕩器以恒定（dìng）功率振蕩10 s ,再用微量吸管（guǎn）在各印模及（jí）模型表麵的1 及6 舌麵, 牙合麵位置吸取10μl 液體,接種於培養平板。表皮葡萄球菌組與枯草杆菌（jun1）組的平板,37 ℃需氧培養（yǎng）24 h 後進行集落形成單位（wèi）(colony-forming unit ,CFU) 計數。血液鏈球菌組的平板,厭氧培養48 h 後進行CFU 計數。

2 　結 果

各（gè）組平（píng）板的CFU 計（jì）數結果見表1～3。

      消毒（dú）效果的評價指標以抑菌率為準5 ,抑菌率= (對照組回收菌數- 消毒組回收菌（jun1）數（shù）) / 對照組回收菌數×100 %。由於每個印模（mó）或石（shí）膏模型表麵接種菌（jun1）液濃度一致（zhì）,取（qǔ）樣接種（zhǒng）量均為10μl ,故以CFU計數表示回收菌數。以染菌後靜置組（zǔ）作為對照組,算得（dé）各組平（píng）板的抑菌率,結果見表4。

以α= 0. 05 為檢驗水準,用SAS 軟件對表4 數據進行統（tǒng）計處理。

      從（cóng）表4 可見,2 %戊二醛浸泡、噴塗（tú）,5 %艾力克（kè）浸泡、噴塗,臭氧櫃5 種方式對表皮葡萄球菌和血液鏈球菌的抑（yì）菌率無顯著性差異（yì）( P > 0105) 。在枯（kū）草杆菌芽孢組,2 %戊二醛浸泡與噴塗間,5 %艾力克浸泡與噴塗（tú）間,臭氧櫃處理與其它各法間（jiān）對枯草杆菌芽孢的抑菌率均有顯著性（xìng）差異( P < 0105) 。2 %戊二醛浸泡與5 %艾力克浸泡其抑菌率無顯著性差異( P> 0105) ,2 %戊二（èr）醛（quán）噴塗與5 %艾力克噴塗其（qí）抑菌率無顯著性差異( P > 0105) 。

3 　討 論

      對消毒劑、消毒方式的評價實驗,按目的可分為三期6 :第一期是實驗室試驗,用以（yǐ）測定一種製劑是否有抗微生物（wù）作用;第二期是在實驗室內模擬實際情況,以檢驗消毒程序;第三期是現場進行試驗,因其標準化實驗（yàn）條件難以實現,故（gù）不常用。本部分研（yán）究屬第二期。

      不同細菌對消毒方（fāng）式有著不同的（de）耐受力,故（gù）消毒學（xué）試驗選用的菌種應為有代（dài）表性的標準菌株,或者是有實際意義,和對（duì）此種消毒方法有較高耐受（shòu）性的菌（jun1）株。目（mù）前國外對印（yìn）模消毒（dú）效果的評價研究,采用的（de）細菌標（biāo）本多為混合（hé）菌液7 ,或為一些抵抗力不強的細菌8 ,如鏈（liàn）球菌、金色葡萄（táo）球菌、大腸杆菌等。但這些細菌既不是（shì）口腔常見細（xì）菌,又抵抗力較差（chà）。故本研究（jiū）選用的（de）是表皮葡萄球菌、血液鏈球菌和枯草杆菌芽孢。血液鏈球菌係口腔很常見的細菌,在牙齒溝裂（liè）中檢出率可高達80 %10 ,為（wéi）牙菌斑主要菌成分之一,亦是一種條件致病菌。表皮葡萄球菌則是院內感染很常被討論的細菌之一。枯草杆菌芽孢接種複（fù）活後,以繁殖體與芽孢形式混合存在,而芽（yá）孢有較強的生命力,能抵抗各種惡劣條件,包（bāo）括各（gè）種較溫和（hé）的消毒措施。

      本研（yán）究（jiū）選用中和（hé）劑是為了中和消毒劑作用,防止其繼續抑製細菌生（shēng）長。但為（wéi）排除中和劑（jì）及其反應產物（wù）對細菌增殖及培養（yǎng）成份產（chǎn）生影響,應在使用前做篩選試驗9 。經篩選（xuǎn）試驗表明013 %Na2SO4 溶液本身及其與2 %戊二（èr）醛或5 %艾力克的（de）反應產物均不會對本研究使用的3 種實驗細菌的生長繁殖產（chǎn）生影響。

      空白對照組的設立是為（wéi）排除由操（cāo）作原（yuán）因可能帶來的汙染。培養結果可見本研究中對材（cái）料器械的消毒準備及操作過程是可靠的,均未（wèi）帶來汙染。染（rǎn）菌後靜置（zhì）組的設立是為排（pái）除靜置過程中細菌自然的死亡。

      從本研究（jiū）可見,無論2 %戊二醛浸泡、噴塗,還是5 %艾力克浸泡、噴塗及臭氧櫃處理對（duì）表皮葡萄球菌和血液鏈球菌均可達到高的抑菌率。此時,各種消毒（dú）措施亦不能體現出消毒效能的差別。這與Rugge2burg 等8 結果一致。而枯（kū）草杆菌芽（yá）孢,由於有較強的存活能力,短時間的浸泡、噴塗或臭（chòu）氧櫃處理對它（tā）均不能（néng）達到高的抑菌率,且各種消（xiāo）毒方（fāng）式的效能也表現出了差別,即浸泡法強於噴塗法,更強於臭氧櫃處理。

      筆者認為一種消毒方（fāng）法要想達到高的（de）消毒效能,除要求消毒劑自（zì）身有強的滅菌能力外,還要求其能（néng）與細菌充分接（jiē）觸,在局部達（dá）到並維持盡可能高的濃（nóng）度。在這一點上,顯（xiǎn）然浸泡法（fǎ）比噴塗法更有優勢,此優勢在細菌具有較強的抵抗能（néng）力（lì）時體現更明（míng）顯。而臭氧（yǎng）因（yīn）其為（wéi）氣體,密度遠小於液（yè）體（tǐ）,故消毒效（xiào）能也明顯低於浸（jìn）泡法和噴塗法（fǎ）。本研究結果證明（míng）2 %戊二醛浸泡、噴塗與5 %艾力（lì）克浸泡、噴塗,均可作（zuò）為有效的印模消毒（dú）方（fāng）法,而臭氧櫃消毒法則可作為石膏模型的消毒方式（shì）。

來源:華西（xī）口腔（qiāng）醫學（xué）雜誌（zhì）