口腔修複臨(lín)床(chuáng)工作中,取(qǔ)印模(mó)及灌注模型等操作所引起的(de)交叉(chā)感染,在國(guó)外已受到口腔醫師的日益重視。Powell 等1 對100 份取自不同城市印模的檢驗表明,67 %樣品有病原菌存在。Gerhardt 等2 的研究證明,藻酸鹽印模表麵有滯留、吸附病毒的能力。Leunge 等3 的研究顯示,微生物可由(yóu)印模汙染石膏模、製作者,乃至打磨、拋光設備,從而引(yǐn)起交叉感染。據Runnell 4 的調查,美國修(xiū)複科醫生血漿中HBV 陽性率高(gāo)達1712 % ,遠高於美國大眾的215 %。鑒於此,歐美國家的許多臨床醫師提(tí)出在修複操作中(zhōng)應嚴格遵守無菌操作原則,並展開了大(dà)量的研究工作。
本研究比較2 %戊二醛和5 %艾力克浸泡(pào)或噴塗,以及臭氧櫃對口腔印模及(jí)石(shí)膏模型的消毒作用(yòng),以(yǐ)探求適合我國國情的(de)印模和石膏(gāo)模型消毒方法。
1 材料和方法
1. 1 材料(liào)和(hé)設備
①Jeltrate 藻酸鉀印模粉普通凝固(gù)型 ,用臭氧消毒櫃處(chù)理2 h。
②石膏母模,橡皮碗,調拌刀,托(tuō)盤等,120 ℃高壓蒸氣滅菌處理60 min。
③013 %Na2SO4 溶(róng)液,作(zuò)為消毒劑的中和液。篩選實驗證實本身及與消毒劑的反應產物(wù)對幾種實驗菌(jun1)均無抑製作用。
④2 %戊二醛溶液(華西醫科大學公共衛生學院配製) 。
⑤5 %艾力克溶液(華西醫科(kē)大學公共衛生學院生產) 。
⑥臭氧(yǎng)消毒櫃 。
⑦表皮葡萄球菌菌株、血液鏈球菌ATCC1057、枯草杆菌芽孢(bāo)ATCC19659(均由華(huá)西醫科大學口(kǒu)腔生物醫學(xué)工程重點實驗室微生物實驗室提供) 。
⑧Die2stone人造石粉 。
1. 2 材(cái)料製備
①製(zhì)備細菌懸液(yè) 取4~14 代表(biǎo)皮葡萄球菌培養平(píng)板,挑取菌苔,以無菌生理鹽水稀釋(shì)至濃度108 個/ ml 。用同樣方法分(fèn)別製備血(xuè)液鏈球菌懸液和枯草杆菌芽(yá)孢菌懸液。
②製取無菌印模和石膏模型 藻酸鉀印模材料用無菌生理鹽水調拌(bàn),用滅菌後的托盤及母模取57 個(gè)印模待用。製取(qǔ)24 個上頜石膏模型,經高溫蒸氣滅菌,然後用無菌生理鹽水將其潤濕(shī)待(dài)用(yòng)。
1. 3 實驗分組和方法
1.3.1 分組
按照所塗細菌不(bú)同分為表(biǎo)皮(pí)葡萄球菌組、血液鏈球菌組和枯草杆菌芽孢組。每組中3 個無(wú)菌印模(mó)和3個無菌石膏模型不染菌作空白對照。餘(yú)16 個印模和5 個石膏模型,用(yòng)無菌(jun1)棉簽分別蘸取3 種(zhǒng)不同細菌懸液在表麵均勻塗抹兩遍。然(rán)後再次分組作以下處(chù)理: ①2 %戊二醛處理組:1 個印模染菌後立即取樣作陽性對照,1 個印模染菌後靜置10 min 取樣,3 個(gè)印模用2 %戊二醛浸泡10 min ,3 個印模以(yǐ)2 %戊二醛噴塗後(hòu)10 min 取樣。②5 %艾力克處理組:1 個印模染菌後立即取樣作(zuò)陽性對照,1 個(gè)印模染(rǎn)菌後靜置(zhì)10 min取樣,3 個印模用5 %艾力克溶液浸(jìn)泡(pào)10 min ,3 個印模以5 %艾力克液噴塗後10 min 取樣。③臭氧櫃處理組:1 個石膏模型染菌後(hòu)立即取樣作陽性對照(zhào),1 個石(shí)膏模型染菌後靜置1h ,3 個石膏模型染菌後臭氧消毒櫃處理1 h 取樣。操作中(zhōng),噴塗(tú)使用同一類型噴槍,噴嘴距印(yìn)模(mó)表麵20 cm ,以每秒1 次的頻率噴塗10 次,控製(zhì)噴塗壓力一致。
1. 3. 2 方法
①所有印模均經中和液處理。吸取5 ml 中和液,分次衝洗(xǐ)印模表麵,中和消毒劑防止其繼續抑製細(xì)菌(jun1)生(shēng)長。石膏模型不用中和液處理。
②取樣,接(jiē)種菌落計(jì)數,每個印(yìn)模(mó)及石膏模型表麵(miàn)各加注5 ml 無菌生理鹽水,用振蕩器以(yǐ)恒定功率振蕩10 s ,再用微量吸管在各印模及(jí)模型表麵的1 及(jí)6 舌麵, 牙(yá)合麵位置吸取10μl 液體,接種於(yú)培養平(píng)板。表皮葡萄球菌組與枯草杆菌組的平板,37 ℃需氧培養(yǎng)24 h 後進行集落(luò)形成單位(colony-forming unit ,CFU) 計數。血液鏈球菌組的平板,厭氧培養48 h 後(hòu)進行CFU 計數。
2 結 果
各組平板的CFU 計數結果見表1~3。


消毒效果的評價指標以抑菌率為準5 ,抑菌率= (對照組回收菌數- 消毒組回收菌數) / 對照組回收菌(jun1)數×100 %。由於每個印模或石膏模型表麵接種菌液濃度一致,取樣接種量均為10μl ,故以CFU計(jì)數表示回收菌數。以染菌(jun1)後靜置組作為對照組,算得各組平板(bǎn)的抑菌(jun1)率(lǜ),結(jié)果見表4。

以α= 0. 05 為檢驗水準,用SAS 軟件對表4 數據進行(háng)統計處理。
從(cóng)表4 可見,2 %戊二(èr)醛浸泡、噴塗,5 %艾力克(kè)浸泡、噴塗,臭氧櫃5 種方式對表皮葡萄球菌和血液鏈球菌的(de)抑菌率無顯著性差異( P > 0105) 。在枯草杆(gǎn)菌芽孢組(zǔ),2 %戊二醛浸(jìn)泡與噴塗間,5 %艾力克浸泡與噴塗間,臭氧櫃處理與其它各法間(jiān)對枯草杆菌芽孢的抑菌率均(jun1)有顯著性差異( P < 0105) 。2 %戊二(èr)醛浸泡與5 %艾力克浸泡其抑菌率無顯著性差異( P> 0105) ,2 %戊二醛噴塗(tú)與5 %艾力克噴塗其抑菌(jun1)率無顯著性差異( P > 0105) 。
3 討 論
對消毒劑、消毒方式的(de)評價實驗,按目的可分為三期6 :第一期是實驗室試驗,用以測定(dìng)一種製(zhì)劑是否有抗微生物作用;第二期是在實驗室(shì)內模擬實際情(qíng)況,以檢驗消毒程序;第三期是現場進行試(shì)驗,因其標準化實驗條件(jiàn)難以實現,故不常用。本部分研究屬第(dì)二期。
不同細菌(jun1)對消毒方式有(yǒu)著不同的耐受力,故(gù)消毒學試驗選用(yòng)的菌種應為(wéi)有(yǒu)代表性的標(biāo)準菌株,或者是(shì)有實際意(yì)義,和(hé)對此種消毒方法有較高耐受性的菌株。目前國外(wài)對印(yìn)模消毒效果的評價研究,采用的細(xì)菌標(biāo)本多為混合菌液(yè)7 ,或(huò)為一些抵抗力不強(qiáng)的細菌8 ,如鏈球菌、金色葡萄球菌、大腸杆(gǎn)菌等。但這些細菌既不是口(kǒu)腔常見細(xì)菌,又抵抗力較差。故本研究選用的是表皮葡萄球菌、血液鏈球菌和枯草(cǎo)杆菌芽孢。血液(yè)鏈球菌係口腔很常見(jiàn)的細菌,在牙齒溝裂中檢出率可高達80 %10 ,為牙菌斑主要菌成分之一,亦是一種條件致病菌。表皮葡萄球菌則是院內(nèi)感染很常被討論的(de)細菌之一。枯草杆菌芽(yá)孢接種複活後,以繁殖體與芽(yá)孢形式混合存在,而芽孢有較(jiào)強的生命力,能抵抗各種惡劣條件,包括各種較溫和的消(xiāo)毒措施。
本研究選用中和劑是為了中和消毒劑作(zuò)用,防止其繼續抑製細菌生長(zhǎng)。但(dàn)為排除中和劑及其反應產物對細菌增殖及培養成份產生影響,應在使用前做篩選試(shì)驗9 。經篩選試(shì)驗表明013 %Na2SO4 溶液本身及其與2 %戊(wù)二醛或(huò)5 %艾力克的(de)反應產物均不(bú)會對本研究(jiū)使(shǐ)用的3 種實驗細菌的生(shēng)長繁殖產生(shēng)影響。
空白對照組的設立是為排除由操作(zuò)原因可能帶來的汙染。培養結(jié)果可(kě)見本研究中對材(cái)料器械的消毒準備及操作過程是可靠的,均未帶(dài)來汙染。染菌後靜置組的設立是為排除靜置過程中細菌自然(rán)的死(sǐ)亡。
從本研究可見,無(wú)論2 %戊二醛浸泡、噴塗,還是5 %艾力克浸泡、噴塗及臭(chòu)氧櫃處(chù)理對表皮葡萄球菌和(hé)血(xuè)液鏈球菌均可(kě)達到高的抑菌(jun1)率。此時,各種消毒措施(shī)亦不能體現出(chū)消毒效能的差別。這與Rugge2burg 等8 結果一致。而枯草杆菌芽孢,由於有(yǒu)較強的存活能力(lì),短時間的(de)浸泡、噴塗或(huò)臭氧(yǎng)櫃處理對它均不能(néng)達到高的抑菌率,且各種消毒方(fāng)式的(de)效能也表現(xiàn)出了差別,即浸泡法強於噴塗法,更強於臭氧櫃處理。
筆者認為一(yī)種消毒方法要想達到高的消毒效能,除要求消毒劑自身有強的滅(miè)菌能力外,還要求其能與細菌充分接觸,在局部達到並維持盡可能高的濃度。在這一點上(shàng),顯然浸泡法比噴塗法更有優勢,此優勢在(zài)細菌具有較(jiào)強的抵抗能力(lì)時體現更明顯。而臭氧因(yīn)其為氣體,密度(dù)遠(yuǎn)小於液體,故(gù)消毒效能也(yě)明顯低於浸泡法和噴塗法。本研究結果證明2 %戊二醛浸泡、噴塗與(yǔ)5 %艾力克浸泡、噴塗,均可作為有效的印(yìn)模消毒方(fāng)法,而臭氧櫃消毒法則可作為石膏模型(xíng)的消毒方式。
來(lái)源:華西口(kǒu)腔醫學雜誌
標簽:臭氧 口腔 印(yìn)模 石膏模型 消毒作用